Diseño y optimización de un sistema de detección de Mycobacterium tuberculosis complex a partir de cultivos aislados de muestras clínicas y cepas tipo, mediante reacción en cadena de la polimerasa (PCR)

Abstract

Con el presente trabajo se pretende establecer un sistema de detección molecular del complejo Mycobacterum tuberculosis que incluye las especies: Mycobacterium tuberculosis y Mycobacterium bovis ; en formato "in house" con sensivilidad y especificidad altas respecto a los sistemas utilizados en forma cotidiana. El diseño de este sistema parte de la selección de un gen específico altamente concervado dentro del grupo a analizar. El gen 16s rRNA fue elegido y estudiado a fin de determinar la secuencia con mayor homología entre las especies agrupadas en el complejo a partir de la cual se diseñaron los primers respectivos. Para optimización del sistema se estrajo el DNA de cultivos aislados de Mycobaterum tuberculosis con lo cual se determinaron el protocolo y programa de ciclamiento para la PCR. El producto de amplificación se observó mediante electroforesis en gel de agarosa al 2 % obteniendose un fragmento de aproximadamente 220bp