Estudio de la robustez de Protocolos para la preparación de muestras orgánicas e inorgánicas a ser observadas en los microscopios electrónicos de Barrido y de transmisión en la Escuela Politécnica del Ejército

Abstract

Con la finalidad de implementar una nueva área de laboratorio en la carrera de Ingeniería en Biotecnología en la Escuela Politécnica del Ejército, se realizó la adquisición de los microscopios electrónicos de ransmisión y de barrido para continuar fomentando la investigación en la Universidad. El presente estudio pretende estudiar la robustez de los protocolos para la preparación de muestras orgánicas e inorgánicas y de esa manera estar en la posibilidad de brindar los mejores servicios de análisis que ofrecen los microscopios a las instituciones y empresas del país. Se estudió protocolos para 13 muestras de referencia, de las cuales 5 fueron tratadas para el MET (microscopio electrónico de transmisión) y 8 para el MEB (microscopio electrónico de barrido); cuando se determinó un protocolo para cada muestra, se lo repitió 10 veces en las mismas condiciones y con el mismo operador para determinar el 90% de su robustez. Los resultados indican que el recubrimiento de las rejillas de cobre con formvar y carbono para soportar las muestras es estable para las nanopartículas de hierro cero Valente y sulfuro de hierro, sin embargo para bacterias y virus es suficiente con una capa de formvar; mientras que para el MEB, se estableció que el tratamiento de fijación con glutaraldehido, post fijación con tetraóxido de osmio, deshidratación alcohólica, secado con freeze drying y metalización con oro es el mejor tratamiento para la conservación de la morfología de las muestras. Los protocolos elegidos para las muestras pueden ser aplicados en el laboratorio ya que las metodologías utilizadas son válidas y confiables