Desarrollo de un medio de cultivo óptimo con diferentes fuentes de carbono, para pseudomonas aeruginosa y bacillus cereus, presentes en suelos que contienen hidrocarburos (TPH), provenientes de PETROAMAZONAS S.A., ubicado en la Provincia de Sucumbíos

Abstract

El objetivo del presente trabajo fue el de determinar la fuente de carbono óptima en el medio mineral y así bioaumentar a Pseudomonas aeruginosa y Bacillus cereus, bacterias específicas y especializadas en la biodegradación de hidrocarburos presentes en suelos que contienen petróleo.

Estas bacterias fueron aisladas por la empresa Qmax y entregadas para este proyecto. Se realizaron análisis macroscópicos y microscópicos para comprobar su pureza. De igual manera se utilizó las claves de identificación API para confirmar su género y especie. Para determinar si Pseudomonas aeruginosa y Bacillus cereus son capaces de vivir en el mismo medio sin ningún tipo de competencia, se realizaron pruebas de antagonismo mediante dos técnicas: placa de agar con discos de papel y pozos por halos de inhibición. Para la obtención de la fuente de carbono óptima, se incubó a Pseudomonas aeruginosa y Bacillus cereus en el Medio Mínimo Mineral (35oC) con diferentes hidrocarburos y se realizó un diseño completamente al azar (DCA). Se evaluaron cuatro (4) tratamientos (gasolina-extra, diesel, tolueno y hexano) y un tratamiento control (sin fuente de carbono). Se midió a cada hora la absorbancia (540 nm) de las muestras bacterianas en los diferentes tratamientos, para posteriormente analizarlas en el programa estadístico SAS donde se realizó el análisis de varianza y prueba de significancia de Tuckey.

Se determinó que las bacterias entregadas por Qmax eran las requeridas para la investigación. Sus características macroscópicas, microscópicas y claves de identificación demostraron que las bacterias son del género y especie requeridos. Tanto Pseudomonas aeruginosa como Bacillus cereus pueden vivir en el mismo medio de cultivo sin la formación de halos de inhibición y no existe ningún tipo de competencia entre ellas. Se determinó que la gasolina-extra (35oC) fue la mejor fuente de carbono, que estimuló en menos de 24 horas un desarrollo óptimo, a diferencia de los demás tratamientos donde el crecimiento bacteriano fue después de 48 horas.