Expresión de tripsina heteróloga en suspensiones de tabaco (Nicotiana tabacum) mediante transfección por el Sistema Nanostraw

Abstract

En la actualidad el mundo se enfrenta a grandes problemas como son el cambio climático, la seguridad alimentaria y la seguridad energética. El termino bioeconomía ha sido introducido como respuesta para solventarlos. Debido a la capacidad para desarrollar modelos de manera sostenible. Uno de los modelos más utilizados en la actualidad es el “biofarming”, que consiste en la producción de moléculas en células vegetales. La obtención producción de biomoléculas, requieren de una técnica de transfección capaz de traspasar la pared celular, sin causar la muerte de las células. El sistema nanostraw ha presentado buenos resultados de transfección en células humanas, debido a que ha combinado dos técnicas de transfección como son la electroporación y la microinyección con nanomateriales. Por ello, la presente investigación propone la expresión de una biomolécula como la tripsina en suspensiones celulares de tabaco utilizando el sistema nanostraw. Las condiciones óptimas en la estandarización del sistema nanostraw fue de 36 V, 6 pulsos y 20 s entre cada pulso, obteniendo una eficiencia del 0.27 % en la eficiencia de introducción del plásmido pSIM24. La expresión de tripsina en el modelo de suspensiones celulares transfectadas por el sistema nanostraw presentó una eficiencia de expresión para el medio de 0,28423 mg de tripsina /ml de medio y de la biomasa de 0,3913 mg de tripsina /Kg en la biomasa.