Implementación de un ensayo de inmunoadsorción ligado a enzima (ELISA) modificado con nanopartículas para la detección de Toxoplasma gondii

Abstract

La toxoplasmosis es una enfermedad parasitaria causada por el protozoo Toxoplasma gondii, este parásito puede infectar tanto animales como humanos. Las mujeres en gestación y personas inmunocomprometida son los más susceptibles a la enfermedad ya que puede provocar complicaciones durante el embarazo, inducir a un aborto o simplemente al transmitirse de manera vertical puede resultar en secuelas neurológicas, oculares y llegando a poner en riesgo la vida del feto. La detección de T.gondii puede darse a través de ensayos serológicos, las pruebas más comunes para su diagnóstico son las pruebas ELISA siendo esta una prueba estándar para la detección de T.gondii. El antígeno de superficie 1 (SAG 1) es considerado como el antígeno de mayor inmunogenicidad del parásito, se lo encuentra en la etapa de taquizoitos, además de su homología en las tres cepas existentes convierte a SAG 1 como una principal molécula de estudio. El presente proyecto tuvo como objetivo implementar un ensayo de inmunoadsorción ligado a enzima (ELISA) modificado con el uso de nanopartículas de oro para la detección de Toxoplasma gondii. Utilizando la proteína recombinante SAG1 como principal antígeno de reconocimiento, mediante espectroscopía Raman fue caracterizada dicha proteína. Mediante la síntesis y el uso de nanopartículas, incrementar la sensibilidad de la prueba para ser comparada con un ensayo sin nanopartículas. De tal manera, se obtuvieron nanopartículas con un pico característico de 526 nm. El espectro Raman presentó picos característicos que indican la presencia de la estructura secundaria de SAG 1. En el conjugado con nanopartículas, se evidenció un aumento en la señal a concentración de antígeno de 0.25 ug/pocillo.