Implementación y optimización de un ensayo de RT-qPCR del biomarcador urinario FOXP3 ARNm para su futura utilización como indicador temprano de rechazo agudo en pacientes sometidos a trasplante renal

Abstract

El rechazo agudo a aloinjerto es el principal obstáculo para la supervivencia de un riñón trasplantado. La biopsia renal todavía es la prueba de referencia en el diagnóstico de la disfunción del injerto, pese a ser un procedimiento invasivo. Diversos estudios indican que los linfocitos T reguladores, que expresan el gen FOXP3, aumentan en el aloinjerto durante el rechazo agudo. En esta investigación, se evaluaron sistemas de RT-qPCR con la química TaqMan® para analizar la expresión del biomarcador urinario FOXP3 ARNm y del gen de referencia 18S ARNr en muestras clínicas de ARN de orina de pacientes no nefrópatas y de pacientes trasplantados renales, proporcionadas por el Hospital Carlos Andrade Marín en Quito, Ecuador. Para ello, se optimizaron los sistemas de RT-qPCR a partir de ARN de sangre total, y paralelamente se estandarizó un método de extracción de ARN a partir de sedimento urinario.