dc.contributor.advisor |
Torres Arias, Marbel |
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dc.contributor.author |
Gómez Hinostroza, Edgar Sebastián |
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dc.date.accessioned |
2019-10-17T10:59:22Z |
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dc.date.available |
2019-10-17T10:59:22Z |
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dc.date.issued |
2019 |
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dc.identifier.citation |
Gómez Hinostroza, Edgar Sebastián (2019). Marcaje fluorescente de la proteína de superficie GP63 de leishmania mexicana mediante CRISPR/CAS9. Carrera de Ingeniería en Biotecnología. Universidad de las Fuerzas Armadas ESPE. Matriz Sangolquí |
es_ES |
dc.identifier.other |
039863 |
es_ES |
dc.identifier.uri |
http://repositorio.espe.edu.ec/handle/21000/21082 |
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dc.description.abstract |
La leishmaniasis es una enfermedad desatendida causada por cerca de 20 especies del género Leishmania, que afecta a un número considerable de personas en el Ecuador y en el mundo; siendo la proteína GP63 esencial para la infectividad del parásito. Por otro lado, la técnica CRISPR/Cas9 ha demostrado ser práctica en la edición genómica de Leishmania spp., tanto para marcaje de proteínas como para silenciamiento de genes. Por lo tanto, en el presente es- tudio se aplicó el sistema CRISPR/Cas9 para fusionar la proteína fluorescente mNeonGreen a GP63, con el fin de que en un futuro se pueda aprovechar su seguimiento en tiempo real. Se logró transfectar Leishmania mexicana con un plásmido que contenía Cas9 y resistencia a hi- gromicina, además de un ADN donador que, además de mNeonGreen, codificaba una enzima de resistencia a G418. Después de días de selección, se obtuvo una población resistente a G418 que sugiere que la transfección fue exitosa, aunque no fue posible observar fluorescencia a la longitud de onda característica de mNeonGreen; surgiendo, asimismo, incovenientes con posi- ble autoflorescencia. Este fenómeno pudo deberse a que la eficiencia de transfección fue baja y las técnicas de sondeo poco sensibles o que la Cas9 guiada por el ARNg tuvo un inconveniente encontrando la secuencia diana, por posibles rearreglos de la cromatina. |
es_ES |
dc.language.iso |
spa |
es_ES |
dc.publisher |
Universidad de las Fuerzas Armadas ESPE. Carrera de Ingeniería en Biotecnología |
es_ES |
dc.rights |
openAccess |
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dc.subject |
ENFERMEDADES PARASITARIAS |
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dc.subject |
PROPIEDADES BIOLÓGICAS |
es_ES |
dc.subject |
INGENIERÍA GENÉTICA |
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dc.subject |
LEISHMANOLISINA |
es_ES |
dc.title |
Marcaje fluorescente de la proteína de superficie GP63 de leishmania mexicana mediante CRISPR/CAS9 |
es_ES |
dc.type |
bachelorThesis |
es_ES |