Producción de anticuerpos IgY contra proteína recombinante Gn y Gc, en Gallus gallus domesticus inmunizadas con ADN solo y acomplejado con polímeros catiónicos

Abstract

Las glicoproteínas Gn y Gc de la superficie de los hantavirus cumplen un papel fundamental en el ciclo de infección viral al permitir la unión y entrada del virus en la célula diana. Los hantavirus pertenecientes a la familia Bunyavirales son los agentes etiológicos de enfermedades zoonóticas transmitidas por aerosoles de orina, heces y saliva de roedores. En América del Sur, países como Chile y Argentina reportan casos donde la cepa de los Andes o Virus de los Andes, que se transmite de persona a persona, causa el síndrome cardiopulmonar por Hantavirus caracterizado por dificultad respiratoria y cardiovascular, cuya letalidad varía entre el 30% y el 50%. En el presente trabajo se propuso a Gallus gallus domesticus como plataforma para la producción de anticuerpos IgY contra proteínas recombinantes Gn y Gc de la envoltura del Virus de los Andes, mediante inmunización con ADN plasmídico solo y acomplejado con polietilenimina. La evaluación del vector pENTRY-GPC, que expresa las glicoproteínas de superficie Gn y Gc, amplificado en E. coli cepa Top10 electrocompetente se realizó mediante inmunofluorescencia que mostró la expresión y distribución de las glicoproteínas en la membrana plasmática de la línea celular HEK-293FT. Los inmunoensayos con IgYs de yema de huevo obtenidas 47 días después de la primera inmunización mostraron especificidad de los anticuerpos para las proteínas recombinantes Gn y Gc. Además, se comparó la expresión temporal del título de anticuerpos en suero y en yema mediante ELISA indirecto. El grupo experimental inmunizado con ADN acomplejado con polietilenimina obtuvo mayor título de anticuerpos en yema, específicos para la proteína recombinante Gn y Gc lo que sugiere que la estrategia de inmunización con ADN solo y acomplejado con polímeros catiónicos en Gallus gallus domesticus produce una respuesta inmune efectiva contra las glicoproteínas Gn y Gc de la envoltura del virus de los Andes.