Abstract:
La producción de anticuerpos humanos recombinantes como agentes terapéuticos constituye en la actualidad una de las industrias de mayor crecimiento debido a la especificidad y eficiencia terapéutica de estas proteínas. Sin embargo, a pesar del continuo avance en el desarrollo molecular y estructural de los anticuerpos, sus métodos de producción siguen dependiendo del uso de líneas celulares, lo que demanda un alto costo de manufactura e incrementa el precio final de estas terapias. Por ello, buscar alternativas que optimicen la producción de anticuerpos terapéuticos a gran escala, es un desafío para la biotecnología actual. En este proyecto, se evaluaron las condiciones de producción de un anticuerpo humano recombinante en células de epitelio de glándula mamaria de cabra (GMGE), para una posterior escalabilidad in vivo, lo que buscaría sustituir la producción de estas proteínas complejas en cultivos celulares. Para ello, se amplificó un vector adenoviral recombinante que codificaba a un anticuerpo humano, hasta la obtención de un título de 1x109 Unidades Formadoras de Color (UFC) por mL. Las células GMGE se infectaron con el vector adenoviral amplificado para evaluar la expresión recombinante con distintas multiplicidades de infección (MOI): 25, 50, 100, 125 y 150 UFC/mL; y la expresión en relación al tiempo se evaluó a las 24, 48, 72, 96, 120 y 144 horas post infección de aquel MOI que presentó la mayor expresión recombinante. En este estudio, las condiciones ideales para la máxima producción de la proteína se dieron con un MOI de 125 UFC/mL durante 144 horas post infección. Además, se evidenció la capacidad de generación de modificaciones post traduccionales de las células GMGE debido al peso molecular obtenido del anticuerpo humano expresado, lo que asegura la integridad tanto del vector adenoviral como de las proteínas recombinantes generadas. Por tanto, se estableció la viabilidad de la producción de un anticuerpo humano recombinante en células GMGE, lo que hace factible el escalamiento de la producción in vivo e in vitro.
