Caracterización de la curva de crecimiento de un aislado propio de Bacillus amyloliquefaciens para determinar el punto de mayor actividad antifúngica utilizando medio rico LB

Abstract

En la actualidad se ha demostrado que el uso continuo de fungicidas comerciales de origen químico, provoca severos daños a la salud y al medio ambiente. Esto crea la necesidad de buscar alternativas biológicas que no representen un riesgo para las especies no objetivo y el medio ambiente. El uso de las bacterias del género Bacillus como agentes de biocontrol representa una opción prometedora, entre las cuales destaca Bacillus amyloliquefaciens por los metabolitos antibióticos que secreta como mecanismo de defensa ante condiciones de estrés biótico o abiótico. Por tal motivo, el objetivo del presente estudio fue encontrar las condiciones nutricionales específicas que potencian su poder antagónico mediante la caracterización de la curva de crecimiento de un aislado nativo de esta especie en medio de cultivo comercial LB y a la par se estudió el nivel de antagonismo de la bacteria durante las fases de su cinética de crecimiento, mediante ensayos de inhibición en céspedes fúngicos de los géneros Penicillium, Alternaria y Fusarium. La máxima turbidez se reportó a las 32 horas mientras que el pico de mayor inhibición fue alcanzado durante la fase estacionaria media tardía a las 38 horas. A partir de punto se aplicó un diseño estadístico de cribado de Plackett Burman sobre seis variables nutricionales añadidas al medio, con la finalidad de conocer cuáles son las más influyentes sobre la actividad inhibitoria de la bacteria. Posteriormente mediante el modelo de Box-Behnken se logró optimizar la formulación del caldo de cultivo reduciendo la cantidad de medio LB a un 30% suplementando el déficit de carbono con 8 gr/L de almidón en un pH inicial de 6,5. El medio optimizado mantuvo su capacidad inhibitoria frente a Penicillium sp. y Alternaria sp. Mientras en en el bioensayo contra Fusarium sp., el halo de inhibición aumento significativamente de 9,49 mm a 10,84 mm. En conclusión, el reajuste en el balance de carbono/nitrógeno en el caldo de cultivo permitió economizar recursos manteniendo y potenciando el efecto fungicida de la bacteria.